Sartobind® Phenyl
Sartobind® Fenil, düşük ligand ikame yoğunluğuna sahip hidrofobik bir etkileşim membranıdır. Bu, tüm biyomoleküllerin saflaştırılması için yumuşak elüsyon koşulları sağlar.
\r\n\r\nSartobind® Fenil membranlar, büyük biyomoleküllerin saflaştırılması sırasında daha az karmaşıklıkla ve boyut dışlama etkileri olmadan çok daha yüksek akış hızlarında çalıştıkları için parlatma (akış) operasyonlarında ve çeşitli bağlama ve elüsyon uygulamalarında sütunların yerini alabilir.
\r\nHidrofobik Etkileşim Kromatografisi (HIC), biyomolekülleri hidrofobikliklerindeki farklılıklara göre ayırır ve saflaştırır. Fenil membran adsorberi, geleneksel hidrofobik etkileşim kromatografisinden bilinen aynı prensipleri takip eder.
Büyük gözenek boyutu nedeniyle, membran adsorberleri mükemmel akış özellikleri sergiler. Geleneksel boncuk kromatografisi ile karşılaştırıldığında, kütle transferinde neredeyse hiç difüzyon sınırlaması yoktur.
Yüksek tuzlu tamponlar, proteinlerin hidrofobik membran matrisi üzerine adsorpsiyonunu destekler. Daha sonra proteinler, elüsyon tamponundaki tuz konsantrasyonu azaltılarak elüte edilir.
Membranın tuza bağımlılığı, amonyum sülfat, sodyum klorür veya sodyum sitrat kullanan sütunlarla karşılaştırılabilir.
Uygulamalar
HIC, hedef proteinleri hidrofobik safsızlıklardan ayırmak için güçlü bir yöntemdir. Büyük proteinler, küçük proteinlere göre daha güçlü bağlanır ve çok noktalı etkileşimler nedeniyle agregatlar, monomerlerden önemli ölçüde daha iyi bağlanır.
Genellikle, protein çözeltisine başlangıçta amonyum sülfat gibi yüksek iyon gücüne sahip bir tampon eklenir. Tuz iyonları numunedeki çözünen maddelerin çözünürlüğünü azaltır. Çözünürlük azaldıkça, açıktaki hidrofobik bölgeler hidrofobik membran matrisi üzerine adsorbe edilir.
HIC membranında, fenil ligandının omurgası olarak esnek selüloz kullanılır. Membran, su veya alkol kullanılarak yeniden oluşturulabilir.
HIC membranı, aşağıdakilerin uzaklaştırılması için kullanılır:
- Agregatlar
- Ana hücre proteinleri (HCP'ler)
- Virüsler
- Endotoksinler
- Lipidler, boyalar, deterjanlar ve köpük önleyici maddeler
- Süzülmüş kromatografi ligandları
Fenil membran ayrıca aşağıdakiler gibi büyük biyomolekülleri bağlamak için de kullanılabilir:
- Monoklonal antikorlar
- Konjuge aşılar, virüsler ve bakteriyofajlar
- Oligonükleotitler
Avantajları
HIC membranları, geleneksel HIC'ye göre aşağıdaki avantajları sunar sütunlar:
- Mükemmel toplam azaltma
- %85'e varan arabellek tasarrufu
- %75'e varan zaman tasarrufu
Kullanım Kolaylığı
- 0,08 mL'den 5 L'ye kadar tak ve çalıştır cihazlar
- Filtre gibi kullanılabilir
- Dakikada 5 yatak hacmine kadar akış hızları
- 100'den fazla döngü için yeniden kullanılabilir veya tek kullanımlık birimler halinde mevcuttur
